1. Cultive 10 ml de bactérias overnight ou até atingir a fase estacionária
2. Meça a turbidez da cultura
3. Centrifugue a cultura e ressuspenda o pellet em 4 ml de solução A
4. Sonique as células por 30 s (5X) ou de acordo com instruções do fabricante do sonicador
5. Centrifugue o extrato de células por 10 min a 13000 rpm em 4 ^oC
6. Transfira o sobrenadante a um novo tubo e aqueça por 15 min a 55 ^oC (para inativar a HP I)
7. Determine a concentração de proteínas utilizando o método de Bradford ou Lowry
8. Dilua H₂O₂ na hora em salina para uma concentração final de 59 mM
9. Em uma cubeta de quartzo adicione: 0.5 ml de salina e 40 µg de proteínas, misturar bem e zerar o espectrofotometro em A₂₄₀
10. Adicione 0.5 ml de H₂O₂ , misture e meça a cinética de diminuição da absorbância em A₂₄₀
11. Calcule a atividade específica de catalase de acordo coma fórmula:

1000 X A240/min (inclinação da reta)/43.6 X mg proteína na cubeta