1. Após SDS-PAGE, lave o gel 2X em 100 ml de água(3 minutos cada lavagem)
2. Incube o gel em uma solução de CBB-G250* por pelo menos 2 h
3. Não há necessidade de descorar o gel
* Solução de CBB-G250:
Componente | Conc. final | Quantidade |
---|---|---|
Água | - | 650 ml |
Sulfato de amônio ((NH4)2SO4 ) | 10% | 100 g |
Coomassie G-250 | 0,1% | 20 ml de uma solução 5% (em água) |
Ácido orto-fosfórico | 3% | 30 ml |
Etanol | 20% | 200 ml |
Volume Final | - | 1000 ml |
Adicione os componentes na ordem da Tabela. Adicione o Commassie somente após o sulfato de amônio haver dissolvido completamente.
Referência
[1] Kang D, Gho SG, Suh M, Kang C. Highly Sensitive and Fast Protein Detection with Coomassie Brilliant Blue in Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis. Bull. Korean Chem. Soc. 2002;11:1511–1512.